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6up空气中细菌种类的测定

发布日期:2020-12-17 14:18

  空气中细菌种类的测定_生物学_自然科学_专业资料。如果对你有帮助,请下载使用! 培养基的制备与空气中微生物的检测 一、实验目的与要求 1、了解并掌握微生物所需的营养成分以及培养基的类型。 2、学习并掌握牛肉膏蛋白胨培养基的配制原理,配制方法以及熟悉实

  如果对你有帮助,请下载使用! 培养基的制备与空气中微生物的检测 一、实验目的与要求 1、了解并掌握微生物所需的营养成分以及培养基的类型。 2、学习并掌握牛肉膏蛋白胨培养基的配制原理,配制方法以及熟悉实验步骤。 3、掌握高压蒸汽灭菌器的原理以及了解其操作步骤。 4、空气中微生物的检测。 二、实验原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类 型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的 种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有微生 物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适 宜的 pH 值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。 任何一 种培养基一经制成就应及时彻底灭菌,以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高 压蒸汽灭菌。 高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升, 使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在 0.1MPa 的压力下,锅内温 度达 121℃。在此蒸汽温度下,可以彻底高效杀死各种细菌及其高度耐热的原理。 空气是人类赖以生存的必须环境,也是微生物借以扩散的媒介。空气中存在着细 菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子,这些微生物粒子是空气污染物的重 要组成部分。空气微生物主要来自于地面及实施、人和动物的蹑手呼吸道、皮肤 和毛发等,它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面,可较长时间停留在空气中。某 些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处,给身体健康 带来严重危害,也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区,给人体带来许 多传染性的疾病和上呼吸道疾病。因此,空气微生物含量多少可以反映所在区域 的空气质量,是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度,需要测定空 气中的微生物数量和空气污染微生物。 三、实验内容 1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备。 2、高压灭菌。 3、空气中微生物的检测。 四、实验步骤 1、查配方 牛肉膏蛋白胨培养基的配方:牛肉膏 1g;蛋白胨 2g;NaCl 1g;琼脂粉 4g; 蒸馏水 200mL;pH 7.0—7.2。 2、称量 3、配制 先将牛肉膏、蛋白胨溶入烧杯中搅拌至完全溶解,再加入其他成分一次溶解, 倒入 500mL 的锥形瓶中,加水至 200mL,加入琼脂粉,拿报纸封口。 4、高压灭菌 5、分装,凝固 6、暴露取样:在指定的地点:一楼、三楼、五楼、七楼各放 2 皿,将平板皿 盖打开,在空气中暴露 10min,时间一到,立即合上皿盖。 7、培养观察:把培养皿置于生化培养箱培养,于 48h 后记录所生长的菌落数。 1 如果对你有帮助,请下载使用! 8、计算 1 平方米空气中的微生物的数目。 奥梅染斯基曾建议:如面积为 100 ㎝ 2 的平板培养基,暴露在空气中 10 分 钟,置于 37℃培养 24 小时后所生长的菌落数,相当于 10L 空气中的细菌数。 X m3 空气中的细菌数 N 5 分钟,置 37℃培养 24 小时后生长的菌落数 r 5㎝ 五、实验数据记录及处理 测得各个楼层的菌落数如下表所示: 1楼 1楼 3楼 5楼 7楼 外 6 11 5 5 2 内 3 16 6 13 3 按照上述公式,计算微生物的数目如下: 1 楼:X(外 1)=764(个) X(外 2)=1401(个) X(外平均)=1083(个) X(内 1)=382(个) X(内 2)=2038(个) X(内平均)=1210(个) 3 楼:X(外)=637(个) X(内)=764(个) 5 楼:X(外)=637(个) X(内)=1656(个) 7 楼:X(外)=255(个) X(内)=382(个) 由计算得出的数据可知,空气中微生物的分布具有不定向性以及不均匀。 六、实验体会 1、微生物需要的营养物质 营养物质应满足微生物的生长、繁殖和完成各种生理活动的需要。它们的作 用可概括为形成结构(参与细胞组成)、提供能量和调节作用(构成酶的活性和 物质运输系统)。微生物的营养物质有六大类要素,即水、碳源、氮源、无机盐、 生长因子和能源。 ① 水:水是微生物的重要组成部分,在代谢中占有重要地位。水在细胞中有两 种存在形式:结合水和游离水。结合水与溶质或其他分子结合在一起,很难加以 利用。游离水(或称为非结合水)则可以被微生物利用。 ② 碳源:碳在细胞的干物质中约占50%,所以微生物对碳的需求最大。凡是作为 微生物细胞结构或代谢产物中碳架来源的营养物质,称为碳源。作为微生物营养 的碳源物质种类很多,从简单的无机物(CO2、碳酸盐)到复杂的有机含碳化合 物(糖、糖的衍生物、脂类、醇类、有机酸、芳香化合物及各种含碳化合物等)。 但不同微生物利用碳源的能力不同,假单孢菌属可利用90种以上的碳源,甲烷氧 化菌仅利用两种有机物:甲烷和甲醇,某些纤维素分解菌只能利用纤维素。 大多数微生物是异养型,以有机化合物为碳源。能够利用的碳源种类很多, 其中糖类是最好的碳源。异养微生物将碳源在体内经一系列复杂的化学反应,最 终用于构成细胞物质,或为机体提供生理活动所需的能量。所以,碳源往往也是 能源物质。 自养菌以 CO2、碳酸盐为唯一或主要的碳源。CO2是被彻底氧化的物质,其转 化成细胞成分是一个还原过程。因此,这类微生物同时需要从光或其他无机物氧 2 如果对你有帮助,请下载使用! 化获得能量。这类微生物的碳源和能源分别属于不同物质。 ③ 氮源:凡是构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质,称 为氮源。细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧。氮是组成核酸和蛋白质的重要元 素,氮对微生物的生长发育有着重要作用。从分子态的 N2到复杂的含氮化合物 都能够被不同微生物所利用,而不同类型的微生物能够利用的氮源差异较大。 固氮微生物能利用分子态 N2合成自己需要的氨基酸和蛋白质,也能利用无机 氮和有

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