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公共场所空气中细菌总数检验方法

发布日期:2021-01-12 03:08

  公共场所空气中细菌总数检验方法_化学_自然科学_专业资料。公共场所空气中细菌总数检验方法 1 定义 撞击法(impacting method)是采用撞击式空气微生物采样器采样, 通过抽气动力作用,使用空气通过狭颖或小孔而产生高整气流,使用 悬浮在空气中的带菌

  公共场所空气中细菌总数检验方法 1 定义 撞击法(impacting method)是采用撞击式空气微生物采样器采样, 通过抽气动力作用,使用空气通过狭颖或小孔而产生高整气流,使用 悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上,经 37° 、48h 培养 后,计算出每 m3 空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。 自然沉降法(natural sinking method)是指直径 9cm 的营养琼脂平板 在采样点暴露 15 分钟,经 37° 、48h 培养后计数生长的细菌菌落数的 采样测定方法。 2 仪器和设备 2.1 高压蒸汽灭菌器。 2.2 干热灭菌器。 2.3 恒温培养箱。 2.4 冰箱。 2.5 平皿(直径 9cm) 。 2.6 制备培养基用一般设备:量筒,三角烧瓶,pH 计或精密 pH 试纸 等。 2.7 撞击式空气微生物采样器。 3 培养基 3.1 营养琼脂培养基 3.1.1 成分;蛋白胨 牛肉浸膏 10g 氯化钠 3g 琼脂 15~20g 蒸馏水 1000ml 3.1.2 制法 将上述各成分混合, 加热溶解, 校正 pH 至 7.4, 过滤分装, 121℃20min 高压灭菌。用自然沉降法测定时,倾注约 15ml 于灭菌平 皿内,制成营养琼脂平板。撞击法参照采样器使用说明制备营养琼脂 平板。 4 操作步骤 4.1 撞击法 4.1.1 选择有代表性的位置设置采样点。将采样器消毒,按仪器使用 说明进行采样。 4.1.2 样品采完后,将带核辐射营养琼脂平板置 36± 1℃恒温箱中,培 养 48h,计数菌落数,并根据采样器的流量和采样时间,换算成每 m3 空气中的菌落数,以 CFU/m3 报告结果。 4.1.3 选择撞击式空气微生物采样器的基本要求。 (a)对空气中细菌捕获率达 95%。 (b)操作简单,携带方便,性能稳定,便于消毒。 4.2 自然沉降法 4.2.1 设置采样点时,应根据现场的大小,选择有代表性的位置作为 空气细菌检测的采样点。通常设置 5 个采样点,即室内墙角对角线 采样点,该交点与四墙角连线 个采样点。采样 高度为 1.2~1.5m。采样点应远离墙壁 1m 以上,并避开空调、门窗 等空气流通外。 4.2.2 将营养琼脂平板置于采样点处,打开皿盖,暴露 5 分钟,盖上 皿盖,翻转平板,置 36± 1℃恒温箱中,培养 48h。 4.2.3 计数每块平板上生长的菌落数,求出全部采样点的平均菌落数, 以 CFU/皿报告结果。 第 2 节 化妆品生产厂房空气微生物检验 1 采样 一般厂房应设五个采样点, 即室内墙对角线交叉处的中点和与中点等 距的四角各点。采样高度为 1.5m。 2 检测方法 2.1 自然沉降法(平板暴露法) 将营养琼脂平板(平皿直径为 9cm)置于采样点,暴露 5 分钟(洁净厂房 暴露=时间可延长)后,置 37℃培养 24 小时,记录每个平板上的菌落数, 并求出全部采样点的平均菌落数.按下列公式计算 1m3 的菌数: 菌数/1m3=50000N/AT 式中:N 为平板计数的平均菌落数,根据采样的原理可分为滤过式、撞 击式、静电式、离心式和液体冲击式等。这些采产器各有优缺点,目 前国际上公认的定量采产方法是裂隙撞击式采样器,如 Calssela 采样 器、Andersen、NBS 采样器,我国研制的 JWL-Ⅰ型和Ⅱ型采样器, THK-201 型采样器, 仿安德森 2 级和仿安德森 6 级空气微生物采样器 等均属于此类。 采样时,将采样器置于采样点,按仪器使用说明进行采样,并记录当 时温度、相对湿文工团及人员活动情况,经培养后,计数所生长之菌 落数,再换算成每立方米空气中细菌数。 第 3 节 化妆品生产环境物体表面微生物检测 1 光滑物体表面(如操作台面,较大机器表面)的采样 可用 5× 5cm 的标准灭菌规格板,放在被测物体表面,根据物体表面 大小,采样 1~4 个,用浸有无菌稀释液的棉拭子在规定板内来回均 匀涂抹整个方可格各部位,并随之转动拭子,剪去手接触部位后,将 棉拭子放入 5ml 稀释液的试管内振打 80 次,作适当稀释后,取 1ml 注入平皿,倾注普通营养琼脂,进行活菌计数,每个稀释度至少作 2 个平行样,计算被检物体表面污染微生物的数量,如检验机器的沟缝 等处时,将机器拆卸,直接用棉试子涂抹。 物体表面污染微生物数(cfu/cm2)=平板上菌落的平均数× 稀释度× 5/ 采样面积(cm2) 2 手的采样 被检人五指并拢, 将浸有无菌稀释放液的棉拭子在双手指屈面从指根 到指端来回涂抹两次,并随之转动采样棉拭子,剪去手接触部位,将 棉拭子放入 5ml 稀释液的试管中振打 80 次,采样液作适当稀释后取 1ml 接种平板,作活菌计数。6up, 手污染总数(cfu/只)=平板上菌落数× 稀释倍数× 5/2 3 包括容器 根据容器大小将适量的无菌稀释液加到容器内,盖紧盖子,振打 80 次,采样液作适当稀释后接种平板。广口的上瓶或盒也可用无菌棉拭 子涂抹方法采样。 容器污染总菌数(cfu/个)=平板上菌落数× 稀释倍数× 所加稀释液量 如怀疑有某种菌污染时,取样后,按该菌的标准检 5.1 装配与包装车间空气中细菌菌落总数应≤2 500 cfu/m3。 5.2 工作台表面细菌菌落总数应≤20 cfu/cm2。 5.3 工人手表面细菌菌落总数应≤300 cfu/只手,并不得检出致病菌。 我们在测车间卫生指标的时候都是使用比较简单的方法: 直接在手上和机器上涂抹,进行比较就可以了,这样比较方便,如果真 的测试的话,我想不是很经济. 你可以参照此方法,对你有帮助!!! 公共场所卫生监测技术规范 Rules of Health Monitoring for Public Places 1 主题容内与适用范围 本规范规定了公共场所开展卫生监测的技术要求。 本规范适用于公共场所开展卫生监测的要求监测工作。 2 名词、术语 公共场所卫生监测包括发证监测,复证监测和经常性卫生监测。 发证和复证监测是指对公共场所经营单位的卫生状况进行监测, 评价 其卫生状况,确定是否发放卫生许可证。 经常性卫生监测是指对公共场所经营单位在取得卫生许可证之是起, 至下次复核卫生许可证之间所进行的卫生监测,促使巩固提高。 3 空气质量监测 3.1 布点原则 3.1.1 布点应该考虑现场的平面布局和立体布局,高层建筑物的立体 布点应有上、中、下三个监测平面,并分别在三个平面上布点。采样 点应避开人流通风道和通风口,并距离墙壁一米远。 3.1.2 确定采样点时可用交叉布点,斜线布点或梅花样布点的方法。 3.1.3 采样时应准确记录采样现场的气温、气压、气温等微小气候采 样流量以及采样时间。 3.2 采样 4 卫生用品、用具的微生物监测 4.1 采样 4.1.1 采样必须在无菌操作下进行。 4.1.2 采样用具,如采样器、试管、广口瓶、剪子等,必须经灭菌。 4.1.3 采样方法 4.1.3.1 涂抹法:将无菌棉拭子蘸取灭菌生理盐水(管内 10m1)后涂 抹用品、用具,然后将拭子放入生理盐水管中,及时送检培养。操作 时应避免人为污染。 4.1.3.2 戳印法:将溶化并冷至 50-55℃的营养琼脂培养基倾注入已灭 菌的特制戳印平皿内(使培养基平面比皿边缘高 2-3mm) ,每皿约 10m1,待凝固后盖上皿盖(皿盖与培养基之间有一定的空隙) ,翻转 平皿在 4℃下保存备用。将被检物(被罩、枕中等)放平,再将皿盖 打开,放在被检物品表面上用手轻按压 3-4 秒钟,取下平皿,盖上皿 盖,送 37℃恒温箱内培养 24 小时计算菌落数

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