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6up水 中 细 菌 总 数 的 检 测

发布日期:2020-10-28 14:58

  水 中 细 菌 总 数 的 检 测_能源/化工_工程科技_专业资料。水 中 细 菌 总 数 的 检 测 一、 实验的目的要求 1、学习并掌握水的细菌学检测方法 2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。 二、实验原理 细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基

  水 中 细 菌 总 数 的 检 测 一、 实验的目的要求 1、学习并掌握水的细菌学检测方法 2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。 二、实验原理 细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃经24h培养后,所生长的 细菌菌落的总数。 细菌总数是评价水质污染程度的主要卫生指标。我国现行的 生活饮用水标准检验方法GB5750—85规定水样中细菌总数测定是1ml水样在普通 营养琼脂培养基中37℃经24小时培养所生长的细菌菌落的总数。 所测定的细菌总 数增多说明水被生活废弃物污染,但不能说明污染的来源。因此必须结合总大肠 菌群数来判断水污染的来源和安全程度。 本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多,它们 对营养和其他生长条件的要求差别很大,不可能找到一种培养基在一种条件下, 使水中所有的细菌均能生长繁殖, 因此, 以一定的培养基平板上生长出来的菌落, 计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。 目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼 脂培养基。 平板菌落计数法的优点: 能测出样品中的活菌数。此法常用于某些成品和生物制品检定以及食品、 水源的污染程度的检定等。 缺点:手续较繁,而且测定值常受各种因素的影响。 生活饮用水细菌卫生标准 我国饮用水卫生标准: 我国饮用水卫生标准: 个大肠菌群/1L 饮水 , ≤ 3 个大肠菌群 个细菌总数/1ml 饮水 ≤ 100 个细菌总数 细菌总数测定 制作培养基平板 定量接 种水样 37℃下培养24h 计数菌落 三、实验仪器和材料 1、 高压蒸汽灭菌锅、恒温箱、冰箱、无菌接种间。 2、消毒酒精、消毒水。 3、 试管、三角瓶、平皿、刻度吸管、涂布器等(实验前包扎灭菌处理好备用) 4、 培养基 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 制备方法: 按照实际的需要量,按上述配方称取各成分混合后,加热溶解,调整pH 为7.4~7.6,,分装于玻璃容器中,用高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌20min,倒 制成平板后储存于冷处备用。 5、水样: 自来水、中水。 氯化钠 5g 琼脂 10~20g 蒸馏水 1000ml 四、实验内容: 实验内容: (一)、培养基的制备: 实验前事先准备好培养基平板(方法见上),每小组2-4个平板。 (二)、取水样: 1、自来水的取样:先将自来水龙头用酒精棉擦拭,再用酒精灯火焰灭菌, 打开龙头放水1-2分钟,用无菌空三角瓶接取水样200毫升。 2、纯净水取样:用消毒酒精棉擦拭纯水机出口后,先放走部分水,再用 无菌空三角瓶接取水样200毫升。 3、池水、河水或湖水应取距水面 10—15cm 的深层水样,先将灭菌的带玻璃 塞瓶,瓶口向下浸入水中,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流入瓶中, 盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,最好立即检查,否则需放入冰箱 中保存。 (三)、接种培养:(要求无菌操作) 用无菌吸管吸取1毫升水样,加入平板中(每个水样平行做两个平板),用 无菌涂布器涂抹均匀,在培养皿侧面标注清楚后,置于37℃恒温箱内经 24h-48小时培养后,统计细菌菌落的总数。 (四)、菌落记数: 菌落计数及报告方法 作平皿菌落计数时,可用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查以防遗漏。在 记下各平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数,供下一步计算时应用。 在求同稀释度的平均数时, 若其中一个平皿有较大片状菌落产生时, 则不宜采用, 而应以无片状菌落产生的平皿作为该稀释度的平均菌落数。 若片状菌落不到平皿 的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半皿计数后乘2以代表全 皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。 五、实验注意事项 六、实验报告内容; 实验报告内容; 1、记录实验方法和步骤。 2、列表说明检测结果。 (1)自来水 (2)饮用水 3、思考题: (1)从自来水的细菌总数结果来看,是否合乎饮用水的标准? (2)你所测的水样污秽程度

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