全国咨询服务热线
0536-21768676

当前位置
主页 > 检测方案 >

菌落总数测定过程中的注意事项你都掌握了吗?

发布日期:2020-07-17 02:33

  在食品微生物检验过程中,测定菌落的总数可以分析菌落的繁殖和生长情况。随着食品安全问题的突出,人们对食品安全的检测精确性提出了更加明确的要求。

  食品企业常用的两个做菌落总数的标准。(当然还有其他标准,这里就不列举了)

  GB 4789.2-2016 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》

  以这两个标准来说,它们的检测方法是差不多,主要区别在于培养基的不同和样品的状态不同。

  (1)取样前的注意问题:在取样前,应确保各类仪器已采取灭菌措施,同时操作人员应严格佩戴无菌帽子、口罩等,并对手进行消毒,确保在各项操作过程中不会污染样品。在微生物检测过程中,由于样品的种类较多,不仅有固体和液体,还有半固体和半液体,部分样品不溶于水,部分样品不用均质的,所以在制备样品过程中,要分析样品的特性,使菌体可分散的展开,否则会导致细菌在检测的过程中出现聚集,对检测结果的精确度产生很大的影响。如果食品的酸度较高,如在检测食酷或酸性饮料的过程中,在样品的稀释环节,应分析样品的酸性值,确保样品的酸性值处于中性,如果样品的酸性值过高,会导致菌落无法在培养基正常生长。

  (2)稀释液的制备:将25mL样品置于225mL的灭菌稀释液中,然后确保其均匀,通过分析样品的污染程度和食品的卫生标准,可选择合适的稀释度连续10倍递增稀释,然后再换1支1ml的灭菌吸管以确保稀释倍数保持准确性。在吸管进出装有稀释液的玻璃瓶时,不能触及瓶口,以免导致污染物的接触,在灭菌稀释液中,应加入样品的稀释液,在加入样品稀释液的过程中,应沿着试管壁慢慢滴入,且不能触及管内的稀释液,防止习惯外侧附着的样品液与稀释液混合,导致稀释液的检测不精确。

  1、在连续稀释后,选择合适的稀释度,在10倍递增稀释的过程中,应吸取1ml,将稀释液放入平皿中,在操作过程中,不要将平血完全打开,应揭开平皿的部分并从侧面加入,在液体流出后,应多停留一会,使管尖内剩余的液体排出,确保稀释度的均匀。

  2、在运用平板计数使,琼脂应先预热,在预热的情况确保其可以融化,并在45℃的水浴中保温。如果温度过高,会导致一些细菌在高温下死亡,影响测定的准确性,还会导致平皿的盖子上出现大量的水汽,冷凝水聚集后会落在培养基的表面,导致大量的细菌生长,导致菌落测定的准确性差。如果温度过低,就导致琼脂凝固,且稀释液体无法均匀分布,菌落不能正常的生长,导致测定的结果存在偏差。

  3、在平时的检验工作中,一次性检测的样品较多,为提高工作效率,实现操作的便捷性,检测人员往往先将所有样品稀释后,再倾注平板,这样1个样品由稀释至倾注平板的时间通常要1h以上。在这个过程中,应有效地防止稀释液体倾注时间过长,如果间隔时间较长,测出的细菌数量将会比实际的数量多。因此.在样品稀释的过程中,应确保倾注的时间控制在20min以内,这样检测的结果会相对准确。

  4、在选择倾注平板时,一般选择容量为15ml的,如果平板过厚,就会导致其透光率变差,如果平板的厚度过小,就会导致菌落无法正常生长。琼脂的底部产生的沉淀是不可以使用的,防止在使用过程中与菌落发生混淆的问题。在倾注平板后,应立刻旋转平,确保稀释液体和琼脂可以均匀混合,防止细菌的大量生长。在琼脂凝固几分钟以后立即把平皿倒置,培养细菌,防止细菌大量的生长和蔓延。在制作样品的过程中,应采用空白对照试验的方式,采用两个规格相同的平板,采用空白可有效地防止污染的产生,且在整个实验环节可做好相关的监控工作,确保实验是在无菌的状态下进行,空白实验对整个实验环节起到至关重要的作用。在平板培养过程中,要合理控制好培养箱的温度,培养箱的温度一般在37摄氏度,如果温度过低,会导致细菌的污染。

  1、在预定的培养时间结束后,应统计菌落的数量,确保测定结果的精确性。在相同的样品中,采用相同的稀释倍数,在平皿上菌落的数量应比较接近,随着稀释倍数的增加应确定好菌落的数量,菌落的数量应随着稀释倍数的增加而减小的。如果平行的平板量差别较大,或稀释的倍数过高,此次测定结果不能作为报告的依据。

  2、如果样品中含有大量的残渣,在对菌落进行计数的过程中就很容易产生误差,所以,在菌落计数的过程中应准确分析,找出残渣和菌落间的差别。残渣的形状不均匀,但菌落的形状固定,而且残渣的颜色较暗淡,菌落的颜色比较鲜亮。如果不能判断菌落和残渣,要对其标记,继续观察。分析平行的两个平皿的菌落数量的平均值,一般情况下,大片的菌落生长的平板是不能使用的,如果所有稀释度的平的菌落数都不能确定,应选择稀释度较小的液体进行实验,如果选择稀释倍数过大的液体.菌落无法正常生长,选择的稀释倍数应与标准限定值相当,不能产生太大的差距。

Copyright ©2015-2020 918博天堂官网【真.正规】 版权所有 918博天堂保留一切权力!