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自来水中细菌总数的测定

发布日期:2020-11-10 10:40

  自来水中细菌总数的测定_物理_自然科学_专业资料。自来水中细菌总数的测定 摘要 水中细菌总数可说明被有机物污染的程度,细菌数越多,有机物含量越大。本实验应 用平板菌落记数技术测定水中细菌总数。 由于水中细菌种类繁多, 他们对营养和其他生长条 件的要求

  自来水中细菌总数的测定 摘要 水中细菌总数可说明被有机物污染的程度,细菌数越多,有机物含量越大。本实验应 用平板菌落记数技术测定水中细菌总数。 由于水中细菌种类繁多, 他们对营养和其他生长条 件的要求差别很大, 不可能找到一种培养基在一种条件下, 是水中所有的细菌均能生长繁殖, 因此,以某种培养基平板上生长出来的菌落,计算出来的细菌总数仅是近似值[1]。本实验采 用普通营养琼脂培养基,该培养基营养丰富,能使大多数细菌生长。所谓细菌总数,是指在 1mL水样在普通营养琼脂培养基中,37℃经24h培养后,所生长出来的菌落数。通过培养观测 得到平均1mL自来水中含有85个细菌菌落,符合国家标准。 关键词 自来水 平板菌落计数技术 细菌总数 测定 引言 水是生命之源, 人的生存离不开水环境, 水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用, 而判断水质的标准,微生物在水中的数量、种类是必不可少的[2]。良好的饮用水细菌总数应 100 CFU∕mL,而500 CFU∕mL则不适宜饮用,我国饮用水卫生标准(GB5749-85)规定, 每毫升水样中细菌总数37℃培养24h不得大于100个[3]。细菌种类对人类健康更为重要,许多 致病细菌常常存在于水中,人们饮用后引发各种疾病,如痢疾,伤寒等,大多是饮用水污染 了这些病原菌之故, 因而测定饮用水中的病原菌是必需的。 本实验只包括一群能在营养琼脂 上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数。 通过此实验我们能够计算出水中的细菌总数, 从而 判断自来水是否符合国家标准, 是否受到污染。 我们可以了解水质评价的微生物学卫生标准 和本地区自来水的卫生状况,从而不断的改善并很好的治理。 1 材料与方法 1.1 时间与地点 2010 年 10 月 27 日 1.2 实验材料 牛乳膏蛋白胨琼脂培养基、自来水、蒸馏水、烧杯、玻璃棒、培养皿、电炉、高压蒸汽 灭菌锅、天平、量筒等 太原师范学院南区微生物实验室 1.3 方法 1.3.1 牛乳膏蛋白胨琼脂培养基的制备[4] 计算并称量一定量的普通标准琼脂培养基固体置于烧杯中,先加入少于所需要的水量, 用玻璃棒搅拌,然后再电炉上加热使其溶解,完全溶解后补充水量至所需的总体积,不断搅 拌直至沸腾,沸腾后继续加热 3 ~5 分钟。 1.3.2 自来水样的检测 将培养皿,吸量管,锥形瓶等仪器在高压蒸汽灭菌锅中灭菌。用灭菌吸管吸取 1mL 水 样,注入灭菌培养皿中。共做 2 个平皿。分别倾注两个 15mL 以熔化并冷却到 45℃左右的 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,并立即放在平整的桌面上,做平面旋转摇动,使水样与培养基充 分混匀。另取一灭菌培养皿,不加水样,倾注牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 15mL,作空白对照。 培养基凝固后,倒置在 37℃,培养 24h,进行细菌计数。两个平板的平均细菌菌落数为 1mL 自来水的细菌总数[5]。 2 结果与分析 自来水细菌总数测定的实验结果 平 空 1 2 板 白 菌 落 0 78 92 85 数 自来水中细菌总数∕ (CFU ?mL-1) 由此可得:该自来水样中每毫升的细菌总数为 85 个,符合我国饮用水标准规定的每毫 升水样中细菌总数不得大于 100 个 ,该自来水水质合格。 3 讨论 3.1 本实验中的注意事项 高压蒸汽灭菌锅使用时,切勿忘记加水,同时加水量不可过少,以防灭菌锅烧干而引起 炸裂事故;灭菌的主要因素是温度而不是压力,因此锅内冷空气必须完全排尽后,才能关上 排气阀,维持所需压力。压力一定要降到 0 时,才能打开排气阀,开盖取物 。标准琼脂培 [6] 养基的熔化时因不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦,沸腾后继续加热 3 ~5 分钟。倾倒培养基时 要确保培养基的温度在 45℃左右,以免温度过高烫死细菌,温度过低感染杂菌且培养基凝 固无法平面旋转摇动使水样与培养基充分混合。 菌落培养时应倒置培养基, 这样菌落就可以 长在培养基表面,有利于菌落的计数 。 3.2 误差分析 取自来水样时, 由于自来水管是塑料的无法用火焰灼烧灭菌, 水样可能会被自来水管口 [7] 的杂菌污染,自来水样置于锥形瓶中暴露在空气中的时间过长,遭空气中的杂菌污染[8]。 倾倒培养基时,培养基的温度降至 45℃以下,导致其他微生物的生长,而受到污染。 3.3 还需进一步探讨的问题 计数时, 菌落的大小是否应该定一个十分精确的标准; 可能培养基内部还长有一些菌落 这会不会影响实验结果;在培养过程中细菌之间的相互抑制是否对结果有影响[9]。 4 结论 实验用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下, 采取自来水的样品, 利用培 养基制作平板,在37℃温箱中,培养24h,进行菌落记数。通过与国家标准进行对比可知在 国家标准范围之内,属于合格自来水[10]。 参考文献 [1]顾孔珍 钱纯 罗岳平.用R2A Agar培养基提高饮用水中细菌总数的检出率[J] 净水技 术,2004,23(1):42-43 [2]罗雪云等 《食品卫生微生物检验标准手册》 中国标准出版社 1995 [3]中华人民共和国 《生活饮用水卫生标准》GB5749-85 [4]郝士海 《现代细菌学培养基和生化试验手册》 中国科学技术出版社 1992 [5][6][7]沈萍 陈向东《微生物学实验》 (第 4 版) 高等教育出版社 2007.11 [8]张秀绘 苏筱军等 生活饮用水细菌学指标的影响因素 环境与健康杂志 2006,23:152 —153 [9]焦瑞身 周德庆《微生物生理代谢实验技术》 北京:科学出版社 1990 [10]陈声明 刘丽丽 《微生物学实验研究方法》 北京:人民教育出版社 1982

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