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6up水中细菌的测定

发布日期:2021-02-23 11:40

  水中细菌的测定_生物学_自然科学_专业资料。水的细菌学检查--细菌总数的测定 目的要求 通过实验掌握水样的采集和水样中 细菌总数测定的方法。 实验原理 ? 生活用水的水源常被生活污水、工业废水 以及人畜粪便所污染。 ? 腐生性微生物对人

  水的细菌学检查--细菌总数的测定 目的要求 通过实验掌握水样的采集和水样中 细菌总数测定的方法。 实验原理 ? 生活用水的水源常被生活污水、工业废水 以及人畜粪便所污染。 ? 腐生性微生物对人无害,而病原性微生物 则能引起传染病甚至流行病,如霍乱、伤 寒、细菌性痢疾和阿米巴性痢疾以及脊髓 灰质炎和传染性肝炎等病毒性疾病。 如何测定水样是否合乎饮用标准? 1、水中细菌总数的测定 水中的细菌总数越多,说明水中有机物的含 量就越高,水体被有机物污染的程度越重。 水中细菌的种属繁多,以一定的培养基平板 上生长出来的菌落,计算出来的水中的细菌的总 数实际上是一种近似值。 绝大多数腐生性和致病性的细菌,可在肉膏 蛋白胨培养基上进行生长。因此应用平板菌落计 数技术来测定水样中的细菌总数基本上能代表水 样中细菌的数量。 水中细菌总数的测定和计算 ? 在肉膏蛋白胨培养基上,1ml水样, 经37℃,24h 培养后所生长出来的总 菌数。 ? 我国饮用水的卫生学指标:在1ml自 来水中细菌总数不得超过100个。 器材 ? 培养基:肉膏蛋白胨琼脂培养基;灭菌水 ? 其他用具:灭菌三角瓶,灭菌培养皿, 灭菌试管 等 操作步骤 1、水样的采取 (1)自来水:水龙头火焰灼烧3min,再开放 水龙头流水5min后,以灭菌三角瓶接取水样 (2)湖水:取距水面10-15cm的深层水样, 最好立即实验,否则放入冰箱中保存。 2、细菌总数测定 (1)自来水 A、用灭菌管吸取1ml水样,注入灭菌培养皿 中,做两个皿。 B、分别倾入约15ml已溶化并冷却到45℃左 右的肉膏蛋白胨琼脂培养基,在桌上作平 面旋摇,使水样与培养基充分混匀。 C、另取一空的灭菌培养皿,倾入约15ml肉膏 蛋白胨琼脂培养基,作空白对照。 D、培养基凝固后,倒置于37℃中,培养24h, 进行菌落计数 。 (2)湖水 A、稀释水样: a、取3个灭菌空试管,分别加入9ml灭菌水。 b、取1ml水样注入第一管9ml灭菌水内、摇匀。 c、再自第一管取1ml至下一管灭菌水内,如此 稀释到第三管,稀释度分别为10-1,10-2, 10-3。 B、自三个稀释度的试管中各取1ml稀释水加 入空的灭菌培养皿中,每一稀释度做两个 培养皿。 C、各倾入约15ml已溶化并冷却到45℃左右 的肉膏蛋白胨琼脂培养基,在桌上作平面 旋摇,使水样与培养基充分混匀。 D、培养基凝固后,倒置于37℃中,培养24h, 进行菌落计数 菌落计数 1、自来水:两个平板的平均菌落数即为1ml 水样的细菌总数。6up! 2、湖水: (1)先计算相同稀释度的平均菌落数。若其 中一个平板有较大片状菌苔生长时,则不 应采用,而应以无片状菌苔生长的平板作 为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的 大小不到平板的1/2,而其余的一半菌落分 布又很均匀时,则可将此一半的菌落数乘2 以代表全平板的菌落数。 (2)首先选择平均菌落数在30-300之间的,当只有 一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则以该平 均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的细菌总数,见 例1。 例次 不同稀释度的平均菌落数 10-1 10-2 10-3 两个稀释度菌 落数之比 菌落总数(个/ml) 1 1365 164 20 —— 16400或1.6×104 2 2760 295 46 1.6 37750或3.8×104 3 2890 271 60 2.2 27100或2.7×104 4 无法计数 1650 513 —— 513000或5.1×105 5 27 11 5 —— 270或2.7×102 6 无法计数 305 12 —— 30500或3.1×104 (3)若有两个稀释度的平均菌落数均在30-300之间, 则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2, 采取两者的平均值,若大于2,则取其中较小的菌 落总数,见例2和例3。 不同稀释度的平均菌落数 例次 10-1 10-2 10-3 两个稀释度 菌落数之 比 菌落总数(个/ml) 1 1365 164 20 —— 16400或1.6×104 2 2760 295 46 1.6 37750或3.8×104 3 2890 271 60 2.2 27100或2.7×104 4 无法计数 1650 513 —— 513000或5.1×105 5 27 11 5 —— 270或2.7×102 6 无法计数 305 12 —— 30500或3.1×104 (4)若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应 按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数,见例4。 不同稀释度的平均菌落数 例次 10-1 10-2 10-3 1 1365 164 20 2 2760 295 46 3 2890 271 60 4 无法计数 1650 513 5 27 11 5 6 无法计数 305 12 两个稀释度 菌落数之 比 菌落总数(个/ml) —— 16400或1.6×104 1.6 37750或3.8×104 2.2 27100或2.7×104 —— 513000或5.1×105 —— 270或2.7×102 —— 30500或3.1×104 (5)若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按 稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数,见例5。 不同稀释度的平均菌落数 例次 10-1 10-2 10-3 1 1365 164 20 2 2760 295 46 3 2890 271 60 4 无法计数 1650 513 5 27 11 5 6 无法计数 305 12 两个稀释度 菌落数之 比 菌落总数(个/ml) —— 16400或1.6×104 1.6 37750或3.8×104 2.2 27100或2.7×104 —— 513000或5.1×105 —— 270或2.7×102 —— 30500或3.1×104 (6)若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间, 则以最近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数,6up见 例6。 不同稀释度的平均菌落数 例次 10-1 10-2 10-3 两个稀释度 菌落数之 比 菌落总数(个/ml) 1 1365 164 20 —— 16400或1.6×104 2 2760 295 46 1.6 37750或3.8×104 3 2890 271 60 2.2 27100或2.7×104 4 无法计数 1650 513 —— 513000或5.1×105 5 27 11 5 —— 270或2.7×102 6 无法计数 305 12 —— 30500或3.1×104 思考题 1、从自来水水样细菌总数检测的结果判断是 否符合饮用水的卫生标准? 2、你所测的池塘水、河水、湖水的污秽度如 何?通过实验你对保护水资源有何认识? 3、试与其他同学的实验结果进行比较,从中 判断你的实验结果误差如何?原因是什么?

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