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918博天堂水中细菌总数的检测

发布日期:2020-10-16 14:18

  水中细菌总数的检测_畜牧兽医_农林牧渔_专业资料。水中细菌总数的检测 1. 实验目的 1、学习并掌握水的细菌学检测方法 2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。 2. 菌落总数 standard plate-count bacteria 水

  水中细菌总数的检测 1. 实验目的 1、学习并掌握水的细菌学检测方法 2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。 2. 菌落总数 standard plate-count bacteria 水样在营养琼脂上、有氧条件下 37°C 培养 48 h 后,所得 1 mL 水样所含菌落的总数。 细菌 总数是评价水质污染程度的主要卫生指标,所测定的细菌总数增多说明水被生活废弃物污 染。 由于结果不能说明污染的来源, 因此必须结合总大肠菌群数来判断污染源和安全程度。 3. 培养基与试剂 2.1 营养琼脂成分 2.2 制法:根据实际需要量,按照上述配方称取各成分混合后,加热溶解,调整 pH 为 7.4~7.6, 分装于玻璃容器中 (如用含有较多杂质的琼脂, 应先过滤。 ) , 经 103.43 kPa (121° C,15 lb)湿热灭菌 20 min,储存于冷暗处备用。 4. 仪器和材料 仪器:高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、水热恒温培养箱、电炉、天平、冰箱。 材料:灭菌 平皿(直径 9 cm)、灭菌试管、刻度吸管、三角烧瓶、采样瓶、酒精灯、消毒水、镊子、 试管架等。 放大镜或菌落计数器、pH 计或精密 pH 试纸、火柴或打火机。 5. 样品采集 自来水的取样: 先将自来水龙头用酒精棉擦拭, 再用酒精灯火焰灭菌, 打开龙头放水 3-5 min, 用无菌空三角瓶接取水样 200 ml。 纯净水取样:用消毒酒精棉擦拭纯水机出口后,先放走部分水,再用无菌空三角瓶接取水 样 200 毫升。 地表水的取样:应取距水面 10—15 cm 的深层水样,先将灭菌的带玻璃塞瓶,瓶口向下浸 入水中,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流入瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出, 最好立即检查,否则需放入冰箱中保存。 6. 检验步骤 生活饮用水(自来水、纯净水):以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 1 mL 充分混匀的水样, 注入灭菌培养皿中,倾注约 15 ml 已融化并冷却到 45°C 左右的营养琼脂培养基,并立即旋 摇平皿,使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种,同时另用一个平皿只倾注 培养基作为空白对照。 待冷却凝固后,翻转平皿,使底面向上,置于 36°C±1°C 条件下连续培养 48 h,进行菌 落计数,即为 1 ml 水样中的菌落总数。 水源水: 以无菌操作方法吸取 1 ml 充分混匀的水样, 注入盛有 9 ml 灭菌生理盐水的试管中, 混匀呈 1:10 稀释液。 吸取 1:10 稀释液 1 ml,注入盛有 9 ml 灭菌生理盐水的试管中,混匀呈 1:100 稀释液。按同 法依次稀释成 1:1000、1:10000 稀释液备用。如此递增稀释一次,必须更换一支刻度吸管。 用灭菌吸管吸取 1 ml 未稀释的水样和 2~3 个适宜稀释度的水样,分别注入灭菌培养皿内, 其余操作同 6.1 生活饮用水的检验步骤。 7. 菌落计数及报告方法 作平皿菌落计数时,可用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查以防遗漏。在记下各平皿的 菌落数后, 应求出同稀释度的平均菌落数, 供下一步计算时应用。 在求同稀释度的平均数时, 若其中一个平皿有较大片状菌落产生时, 则不宜采用, 而应以无片状菌落产生的平皿作为该 稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,918博天堂则 可将此半皿计数后乘 2 以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。 不同稀释度 的选择及报告方法 首先选择平均菌落数在 30~300 之间者进行计算, 若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范 围时,则将该菌落数乘以稀释倍数报告之(见表 1 中实例 1)。 若有两个稀释度,其生长的菌落数均在 30~300 之间,则视二者之比值来决定:若其比值小 于 2,应报告两者的平均数(如表 1 实例 2);若比值大于 2,则报告其中稀释度较小的菌 落数(如表 1 实例 3)。若等于 2 亦报告其中稀释度较小的菌落数(见表 1 实例 4)。918博天堂。 若所有稀释度的平均菌落数均大于 300, 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告 之(见表 1 中实例 5)。 若所有稀释度的平均菌落数均小于 30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告 之(见表 1 中实例 6)。 3 若所有稀释度的平均菌落数不在 30~300 之间,则应以最接近 30 或 300 的平均菌落数乘以 稀释倍数报告之(见表 1 中实例 7)。 若所有稀释度的平板上均无菌落生长,则以“未检出”报告之。 如果所有平板上都菌落密布,不要用“多不可计”报告,而应在稀释度最大的平板上,任 意数其中 2 个平板 1 cm2 中的菌落数, 除 2 求出每平方厘米内平均菌落总数, 乘以皿底面积 63.6 cm2,再乘以其稀释倍数报告之。 菌落计数的报告:菌落数在 100 以内时,按实有数 报告;大于 100 时,采用两位有效数字,在两位有效数字后面的数值,以四舍五入法计算; 为了缩短后面的零数,也可以用 10 的指数来表达(见表 1“报告方式”列。) 8. 生活饮用水卫生标准规定:菌落总数不超过 100 CFU/ml。 列表说明检测结果。 (1)自来水 (2)从自来水的细菌总数结果来看,是否合乎饮用水的标准?

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